Vesinikperoksiidiga desinfitseerimise ja steriliseerimise tulemuste jälgimine ja kontrollimine bioohutuskappides

Pärast vesinikperoksiidi (eriti aurustatud vesinikperoksiidi VHP) kasutamist desinfitseerimiseks ja steriliseerimiseks bioohutuskappides on range ja teaduslik seire ja tulemuste kontrollimine ainus viis kinnitada steriliseerimise tõhusust, samuti kvaliteedikontrolli põhinõudeid ja eeskirjade järgimist. See ei ole lihtsalt „seadme käitamise” protsess, vaid suletud-ahela protsess, mis nõuab mitmeid füüsikalisi, keemilisi ja bioloogilisi tõendeid.
Järgnevalt on seire- ja valideerimistehnikate süstemaatiline analüüs.
Põhiprintsiip: kolmekordne kontrollsüsteem
Täielik valideerimine peaks hõlmama "protsessiparameetrite jälgimist", "keemilisi indikaatoreid" ja "bioloogiliste näitajate testimist", mis kõik täiendavad üksteist ja on asendamatud.

See on esimene kaitseliin kontrollimiseks, mis hõlmab peamiste füüsikaliste ja keemiliste parameetrite reaalajas salvestamist-seadme andurite kaudu, mis tõestab, et steriliseerimistsükkel toimib määratud ja tõhusa parameetri vahemikus.
Seire parameetrid:
Vesinikperoksiidi aurude kontsentratsioon (ppm): kõige kriitilisem parameeter. See tuleb saavutada ja säilitada etteantud sihtkontsentratsioonil (nt sadu ppm) piisava aja jooksul. Madal kontsentratsioon võib põhjustada steriliseerimise ebaõnnestumise.
Suhteline õhuniiskus (% RH): reguleeritakse madalal tasemel (tavaliselt).<40%) to ensure that VHP is in an efficient "micro condensation" state rather than large droplet condensation. Excessive humidity can dilute disinfectants and may damage equipment.
Temperatuur: jälgige kambri temperatuuri, mis mõjutab küllastunud auru rõhku ja kondenseerumisprotsessi.
Rõhk/õhuvool: veenduge, et kamber on suletud ja gaasiringlus normaalne.
Kokkupuuteaeg: sihtkontsentratsiooni juures hoitud kestus.
Kuidas teostada:
Automaatselt täidetakse VHP generaatorisse sisseehitatud andurite ja juhtimissüsteemiga.
Põhinõue: seadmed peaksid suutma luua ja salvestada täielikke tsüklilisi andmegraafikuid (kontsentratsiooni ajakõver, temperatuuri ja niiskuse kõver), mis tuleks lisada valideerimisaruandesse. Iga parameetri kõrvalekalle eelseadistatud vahemikust peaks kaasa tooma häire või ahela lõpetamise.

Kasutatakse kiireks ja intuitiivseks määramiseks, kas ese puutub kokku vesinikperoksiidiga steriliseerimiskeskkonnaga, ja võib kaudselt kajastada, kas annus on piisav.
Tüüp ja põhimõte:
Märgistustüübi keemilise indikaatori kaart: Sisaldab vesinikperoksiidi suhtes tundlikke värvaineid. Piisava koguse vesinikperoksiidi doosi (kontsentratsioon x aeg) kogumisel tekivad pöördumatud muutused ühelt värvilt teisele.
Paigutamise koht: see tuleks asetada kõige raskemini ligipääsetavasse steriliseerimiskohta, näiteks:
Turvakapi tööruumi sügavaim nurk.
Drenaažikanali sees.
Filtri ja paigaldusraami vaheline ühenduskoht (võimaluse korral).
Sisemine väljalasketoru (kui see on desinfitseeritud).
Funktsioon ja piirangud:
Funktsioon: annavad kiireks vabastamiseks kohesed tulemused; Veenduge, et aur on määratud kohta jaotatud; Identifikaatorina "töödeldud" ja "töötlemata" üksuste eristamiseks.
Piirangud: saab tõestada ainult kokkupuudet, ei saa tõestada steriilsust. Värvimuutus näitab vaid minimaalse doosiläve saavutamist, kuid ei garanteeri kõigi mikroorganismide hukkumist.

See on kontrollimise ja otsustavate tõendite kuldstandard. Kasutades teadaolevalt kõrge resistentsusega standardiseeritud mikroobieoseid, on otseselt tõestatud, et steriliseerimisprotsess on piisav kõige raskemini hävitatavate mikroorganismide hävitamiseks.
Bioloogiliste näitajate valik:
Standardtüvi: Geobacillus stearothermophilus eosed. See on rahvusvaheliselt tunnustatud standardkatsebakter, millel on kõige tugevam resistentsus vesinikperoksiidi suhtes.
Kandja vorm: tavaliselt eossuspensiooni tilkadega värvitud pabeririba, roostevaba terasleht või paigaldatud kindlale kandjale.
Teadaolev eoste arv: iga bioloogiline indikaator sisaldab teadaolevat arvu eoseid, tavaliselt 10 ^ 5 kuni 10 ^ 6 CFU (kolooniaid moodustavad ühikud).
Paigutuse strateegia (kõige kriitilisem samm):
Asukoht: see tuleb asetada kõige külmemasse kohta, kus steriliseerimine on kõige keerulisem või kus gaas on kõige raskem läbi tungida. Bioohutuskappide jaoks on soovitatavad asukohad järgmised:
Töölaua all, nurgas esivõre lähedal.
Tagaseina ja töölaua vaheline ristmik.
Sisemiste instrumentide, näiteks pipetihoidikute tagaküljel või lünkades.
Kui kontrolli ulatus hõlmab väljalaskeklapi või torujuhtme sisemust.
Kogus: Kasutage vähemalt 3 bioloogilist indikaatorit ja lisage üks töötlemata positiivne kontroll.
Testimis- ja tõlgendamisprotsess:
Kokkupuude: viige läbi täielik VHP steriliseerimistsükkel BI-kapiga.
Taaskasutus ja kasvatamine:
Pärast tsükli lõppu eemaldage BI steriilsetes tingimustes.
Pange see spetsiaalsesse söödet sisaldavasse taastumistuubi.
Kasvatage 56-60 kraadises C inkubaatoris 24-48 tundi (täpsemat aega vastavalt juhistele).
Kasvatage samaaegselt positiivset kontrolli (steriliseerimata) ja negatiivset kontrolli (steriilne sööde).
Tulemuse tõlgendamine:
Kontrollimine õnnestus: kõik steriliseeritud BI-söötmed jäävad selgeks (ilma värvimuutuse/hägususeta), mis viitab eoste ellujäämisele. Positiivne kontroll peab näitama aktiivset kasvu (kultuurisöötme kollasus/hägusus) ja negatiivne kontroll peab jääma selgeks.
Tõrketõrge: kõik töödeldud BI, mis näitavad kasvu (kollasust/hägusust), viitavad steriliseerimistsükli tõrkele. On vaja põhjalikult uurida põhjuseid (näiteks parameetrivead, paigutus, seadmete talitlushäired, tihendusprobleemid jne), plaani kohandada ja uuesti läbi viia täielik kontroll.

Esimene kinnitus:
Pärast VHP seadmete paigaldamist või uut tüüpi turvakapi esmast steriliseerimist tuleb see läbi viia.
See on kõige põhjalikum kontroll, mis nõuab "külma punkti" määramist ja tõhusate ahela parameetrite määramist.
Regulaarne korduskinnitus:
Tavaliselt viiakse läbi iga kuue kuu tagant või kord aastas.
Kasutatakse seadmete, programmide ja operaatorite järjepidevuse kinnitamiseks.
Igapäevane jälgimine:
Iga steriliseerimistsükli jaoks tuleks kasutada keemilisi indikaatoreid ja protsessiparameetrite kaardid tuleks üle vaadata.
Bioloogiliste näitajate testimise sagedust saab vastavalt vajadusele vähendada (näiteks kord kuus või kord kvartalis), kuid rangete eeskirjadega piirkondades võib olla vaja kasutada iga partii/tsüklit.

Kõik seire- ja kontrollitoimingud tuleb ametlikult dokumenteerida ning aruanne peaks sisaldama vähemalt järgmist:
Varustusinfo: VHP generaatori mudel ja number.
Sihtseadme teave: Biosafety kapi mudel, number, asukoht.
Silmuse parameetrid: seadke sihtkontsentratsioon, aeg, temperatuur ja niiskus jne.
Protsessi andmete graafik: tegeliku töö kontsentratsiooni aja kõver jne.
Keemilised näitajad: tüüp, partii number, paigutuskoht, värvimuutuse tulemused (koos lisatud fotodega).
Bioloogilised näitajad: tüvi, partii number, eoste kogus, paigutuskoht, kultiveerimistulemused (lisatud koos kultiveerimistuubi fotodega).
Järeldus: tehke selgelt kindlaks, kas steriliseerimistsükkel on tõhus.
Teostaja ja kuupäev: operaatori ja ülevaataja allkiri.

kokkuvõte
Steriliseerimata steriliseerimine võrdub steriliseerimiseta.
Usaldusväärne valideerimissüsteem vesinikperoksiidiga desinfitseerimiseks ja bioohutuskappide steriliseerimiseks on:
Tagada protsessi juhtimine "protsessiparameetrite kaardistamise" abil, saavutada kiire visuaalne vabastamine "keemiliste indikaatorite" abil ja lõpuks saada mikrobioloogilise ülima tõhususe sertifikaat "bioloogilise indikaatori väljakutse testimise kaudu".
See kolmekordne valideerimissüsteem on võti vesinikperoksiidi desinfitseerimise tõstmisel "operatsioonist" jälgitavaks, reprodutseeritavaks ja usaldusväärseks "teaduseks" ning see on ka GLP, GMP ja bioohutuse labori akrediteerimise nõuete täitmise nurgakivi nii kodus kui ka välismaal. Laborijuhid peavad seda rakendama kohustusliku protseduurina ja seda pidevalt jälgima.